13个月发证：一种抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法、装置及应用（广东省中医院）

一、发明专利案件基本信息

技术领域：生物医药及医疗技术

专利号：CN202110391652.2  

专利名称：一种抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法、装置及应用

专利申请日： 2021-04-13

专利授权日： 2022-05-27

专利申请人：广东省中医院(广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院）

发明人：陈前军，张玉柱，梁倩怡，刘晓媛，罗天裕，李华超，张宏艳，卢海，李东梅，许锐，任黎萍

专利代理机构：广州高炬知识产权代理有限公司

专利代理师：孙明科

二、发明证书

三、发明专利申请文件信息

申请文件：19页，9.9万字，附图12

授权权利要求：9，其中独立权利要求：2

权项结构树：

 

四、合享发明专利价值度评分

五、发明内容摘要：

本发明公开了一种抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法、装置及应用，该方法包括如下步骤：将小鼠置于束缚装置内，使其不能动作，每天束缚4小时、维持12小时的光‑暗循环，共持续3周或以上时间，构建得到具有抑郁障碍相关表型的自发乳腺癌转基因小鼠抑郁障碍动物模型。本发明还公开了其束缚装置，将该动物模型用作模拟人类乳腺癌与抑郁症过程、及筛选诊疗药物或疗法。本发明构建的动物模型，具有重复性好、个体差异小、建模时间短、动物死亡率低等优点，可广泛应用于模拟人类抑郁症诱发乳腺癌及相关疾病病理和诊疗物质的筛选与疗效验证。

六、发明摘要附图：

本发明自发乳腺癌小鼠11周乳腺组织HE染色结果照片

七、独立权利要求2项：

1 .一种抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，其特征在于，其包括如下步骤：

（1）培育5周龄、MMTV‑PyMT转基因自发乳腺癌的小鼠，作为实验动物，并将其分为对照组、造模组两组；

（2） 制备使小鼠发生抑郁症的束缚装置；

（3）将造模组小鼠在设定的障碍条件下饲养：将每只小鼠独立装入到一个室内束缚装置内，通过机械方式使其身体压迫在束缚装置内、不能扭头转身、不能动作，每天束缚4小时，维持12小时的光‑暗循环，共持续3周或以上时间，使其罹患抑郁症；

对照组小鼠在野外自由环境下饲养、不被束缚，两组其他饲养条件均一致；

（4）分别对造模组与对照组小鼠，进行动物行为和生理组织检测，是否具备抑郁障碍相关表型；如造模组小鼠具有抑郁障碍相关表型，则得到抑郁症诱发乳腺癌的动物模型。

7 .一种采用权利要求1～6之一所述方法构建的抑郁症诱发乳腺癌动物模型的应用，其特征在于，将该模型用于检测乳腺癌与抑郁症之间发病及病变过程的关联性实验。

八、本发明主要的有益效果：

1）本发明提供抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，采用MMTV-PyMT转基因小鼠为实验动物，采用机械束缚装置使其逐步罹患抑郁症，结合其自发乳腺癌转基因，可以较好的实现模拟人类的抑郁症诱发乳腺癌病理发生与发展进程的过程。其构建的动物模型，具有性能稳定、可重复性好、操作便捷、动物个体差异小、造模时间短、动物死亡率低等优点。在实际操作中，实验动物的应激较小，伤害较小，可以减少外伤对动物模拟发病过程的影响。

2）本发明提供抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，采用的MMTV-PyMT转基因FVB小鼠为原发性动物模型，可模拟原发性乳腺癌发病过程，其采用特定的剥离MMTV病毒，导致小鼠乳腺肿瘤的重要病毒的组织特异启动子和增强子，来介导PyMT癌基因在乳腺中高表达，从而诱发乳腺上皮细胞中PyMT基因的表达失控，进而诱发细胞的恶性增殖，导致乳腺癌的发生；其模拟效益优于移植性动物模型。同时，FVB小鼠容易焦虑，其自身不容易自发产生肿瘤。因此，适合于作为本发明抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建。

3）本发明提供抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，通过实验动物的选择与实验装置的结合，构建周期短，经测试3周后实验动物的行为学即发生明显改变，可以加快实验过程、缩短实验周期。

4）本发明提供抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，其构建的自发乳腺癌转基因小鼠抑郁症模型，可以广泛用于模拟人类抑郁障碍对乳腺肿瘤发生机制的影响，同时该动物模型，构建过程稳定的、可重复、操作便捷，并且可较好的模拟人乳腺癌与抑郁症相互影响下病理的发生与发展进程。

八、发明人团队简介

本发明由广东省中医院乳腺科主任医师陈前军教授团队研发完成。陈前军教授，教授，主任医师，医学博士，博士研究生导师。广东省中医院乳腺大科主任，广东省“杰出青年医学人才”，中华中医药学会乳腺病分会主任委员，世界中医药学会联合会乳腺病专业委员会副会长，广东省中医药学会乳腺病专业委员会主任委员，广州中医药大学中医外科学学术带头人，中华中医药学会乳腺病分会主任委员，中国临床肿瘤学会（CSCO）乳腺癌专委会委员，中国抗癌协会（CBCS）乳腺癌专委会委员，广东省医学会外科分会乳腺学组副组长。该团队包括张玉柱博士、硕士等多名专家级研究人员，具有丰富的临床实践及研发经验。

广东省中医院（广州中医药大学第二附属医院、广州中医药大学第二临床医学院、广东省中医药科学院、广东省中医药研修院），是三级甲等医院，始建于1933年，是我国近代史上最早的中医医院之一，被誉为“南粤杏林第一家”，是国家中医临床研究基地建设单位，以及广东省首批高水平医院建设单位。该医院是全国规模最大的中医医院，连续8年蝉联全国中医医院竞争力排行榜榜首。2021年门诊服务患者684万人次、住院患者超15万人次。

九、本案专利代理师经验分享

   

抑郁症（也称抑郁障碍）是一种广泛的慢性医学疾病，可能会影响思想，情绪和身体健康。其特点是情绪持续低落、烦躁不安、动机受损等，从精神动作障碍到认知障碍不等。抑郁还与严重的身体健康合并症有关，包括心血管疾病、代谢风险因素，如肥胖、过早死亡，对社会造成巨大的经济损失。抑郁症的治疗和预防仍然是公共卫生的优先事项。

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤，是全球三大最常见的癌症之一，女性一生中患上乳腺癌的概率高达8%-10%，严重威胁了现代女性的健康。乳腺癌小鼠模型是研究乳腺癌疾病发生机理和药效学评价中的重要工具。一般乳腺癌小鼠模型主要分为移植瘤和原发性瘤。原发性乳腺癌模型保留有正常乳腺组织中的各类细胞和精细结构,拥有癌细胞发生和生长的微环境，这种高度的还原性使原发性乳腺癌模型无论在组织学，还是在病理学方面都拥有比移植瘤更高的拟真性，因此，原发性的乳腺癌小鼠模型成为乳腺癌发生和转移机理的理想模型。

然而，由于存在多种技术困难，目前尚缺乏一种可模拟抑郁症诱发乳腺肿瘤机制的动物模型，同时，由于目前对抑郁障碍研究所使用的动物模型存在操作复杂、可重复性差、个体差异大、造模时间长、动物死亡率高等缺点，无法将其直接应用于模拟诱发乳腺癌的动物模型。因此，本领域迫切需要开发一种稳定的、可重复的、操作便捷的、可模拟人类抑郁症诱发乳腺癌病理发生与发展进程的动物模型。

针对这一情况，本发明人团队研发了一种抑郁症诱发乳腺癌动物模型的构建方法，通过操作简便、可重复性强的建模方法，对试验动物进行机械限制、使其罹患抑郁症并结合自发乳腺癌，用来模拟研究人类的抑郁症诱发乳腺癌的相关表征和机理；本发明还提供了一种实施该方法的束缚装置，该装置结构紧凑、易于使用；同时，本发明还进一步提供了该动物模型在医疗领域的应用。

本专利涉及多个学科和技术领域，包括疾病医疗技术、生理病理分析、生物医药研发筛选、动物模型、物理器械及效果验证等技术，对专利代理师的跨领域的专业能力、综合水平，对医疗诊断、生物医药及动物模型技术领域的经验要求较高。我公司派出专利代理师孙明科与研发团队对接，多次到访研发团队研发场所，进行面对面演示、讲解和交流。经过反复多次与研发团队深入交流，共同分析技术问题和发明要点，在深度检索和多次撰写修改的基础上，完成了本项发明专利的申请文件。本案专利代理师通过与研发团队成员密切沟通，认真听取发明人的构思和技术方案，并且进行了深入的技术挖掘，准确缩短技术问题和技术效果，从而得到了本发明呈现的较为完善的技术方案。

本案件由于涉及疾病性状、发病机理模拟及动物建模、医药开发及筛选技术，属于生物医药技术领域，具有较大的社会意义，专利代理师在提交、审查意见答复、缴费等多个环节均做了快速处理，最终使本发明按照正常审查流程，能够使本发明在13个月的时间颁发了发明证书，为发明人团队尽早实施该专利技术创造了良好的条件。

   本专利是专利代理师与发明人团队密切合作完成的跨领域高质量专利申请案件，双方多次、反复讨论、修改了多稿才最终定稿，发明人科研团队及代理师对本发明均付出了辛苦的劳动。

本发明专利作为生物医药领域的高质量的发明专利，与申请人布局的其他发明专利相互配合，对建模方法、建模器械、医学应用等进行了合理分层、递进式的保护，采用快速的申请和审查答复，大幅缩短了审查时间。本发明专利快速获得授权后，有利于该申请人对该专利技术成果进行转化、实施，尽早投入使用，造福广大患者，产生更好的社会和经济效益。